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【深度热点】优秀实验员的第一步—正确使用移液枪

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2019-01-08 09:22
来源:嘉峪检测网
互联网
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  移液枪在实验室不可或缺,但反复操作难免有失误,所以说优秀的实验员都是从正确使用移液枪开始的。

  移液枪使用诀窍

  移液枪是实验操作上不可缺少的工具,对于顶尖高手而言,重要的就是实验的误差最小,重复再现性好,那就要注意正确移液枪使用。

  1. 影响移液枪精度因素

  (1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差

  (2)气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差

  (3)吸速:容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头

  (4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法:反复抽吸4-5次就可改善。

  2. 具体使用方法

  更换tip法:最精确。

  (1)调节旋钮到所需刻度位置,诀窍:首先可略超过一些,再回旋至刻度。注意禁止超过最大刻度,避免人为误差。

  (2)插上tip:无菌操作时,要注意动作迅速正确,不能用手碰tip,动作的力度要保持一致,禁止废动作。普通操作时,可用拇指食指上紧,但手不能碰tip尖端处。

  (3)指压到第一段,tip尖端接触试剂。白色tip进到液面1 mm一下,黄色tip 2-3 mm,蓝色tip2-4 mm,避免液压的影响造成的误差。

  (4)缓慢吸试剂,禁止速度过快,液体进入枪头。

  (5)移出tip后,先在容器内壁轻轻靠住,使tip外壁液体流下。

  (6)将tip贴在目标容器内壁,轻轻按到第一段,压出液体。

  (7)tip 尖端在容器内壁略上滑动,保留尖端少量液体,移出目标容器,手指卸掉 tip,注意不要使试剂溅出。

  一只tip分注法:不适用于挥发性,有毒性试剂。

  (1)同上述(1)-(4),移出液面后,先缓慢按到第一段,在用力按到第二段,将试剂全压出。

  (2)同上述(3),缓慢吸出液体。

  (3)在目标容器液体上空,压出试剂到第二段,注意压的力度要和A相同,还应注意试剂不要四处飞溅。

  (4)缓慢返回第一段,可重复上述操作。达到目标容器原有液体不污染tip的目的。

  转移数ul的贵重试剂时的方法:

  (1)同上述(1)-(4),移出液面后,在容器内壁轻按几下,使外壁液体流下。白色tip进到液面1 mm以下,这最重要。

  (2)tip尖端浸入目标容器的液面下,缓慢压到第一段。

  (3)松开,返回到第一段,重新吸入液体,反复4-5次,,洗净tip内壁液体。

  (4)将tip 尖端移出液面,在内壁轻轻靠住,压出液体到第二段。

  移液六部曲

  1. 装吸头

  移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。

  错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。

  2. 量程设定

  操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10-100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35-100%量程范围内操作。

  量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。

  3. 润洗

  用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。

  注意:高温或者低温液体请不要润洗!

  4. 吸头浸入角度

  吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°。

  5. 吸头浸入深度

  6. 吸头浸入时间

  吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。

  7. 吸液速度

  匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。

  8. 排液及吹液

  先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。

  排液四种方式:

  9. 手温

  移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。

  移液器错误操作及处理方法

  做为液体操作中最常用的手动可调精密移液器,在使用过程中有些错误的操作会给操作本身带来误差,有些会造成机器的损坏等,在这里简单总结如下:

  错误:装配吸头时用移液器反复撞击吸头,以上紧

  正确:插入吸头,左右轻转旋转上紧吸头

  分析:撞击会造成移液器内部齿轮组合的松动,长期操作会对移液器的精确性造成影响。

  错误:吸头与移液器不匹配,影响气密性

  正确:选用与移液器匹配的,有质量保证的吸头

  分析:吸头的不匹配,主要表现为对气密性的影响。会直接影响移液器的精确性,通常会移液操作会小于设定量。

  错误:吸液时,移液器倾斜吸液

  正确:垂直吸液

  分析:倾斜的状态会造成气压面的改变。会对移液精度造成影响。

  错误:吸头内含有未打出的液体时,移液器平置于桌面

  正确:将移液器垂直挂在移液器支架上

  分析:吸头内含有未打出液体,移液器平放之后液体有可能会流到移液器体内部,这会对移液器内部组件造成影响,严重的回造成损坏,较差污染等情况的发生。

  错误:用大量程的移液器移取小体积的液体

  正确:移液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求

  分析:因为空气垫的存在,是造成移液器不准确度的主要原因。移液器的选择应该是最大量程,最接近目的液体转移量的选型原则。

  错误:吸取具有强挥发性的液体

  正确:不建议用普通移液器做强挥发型液体转移

  分析:如果一定要移取强挥发性的液体,应该在移液结束后立刻拆开移液器,让蒸汽挥发,同时,建议使用外置活塞式移液器。

  错误:吸液速度和放液速度过快

  正确:慢吸慢放

  分析:快吸对于1mL及以上量程的移液器,很容易造成液体上冲。过快的放液会增加液体的残留量。

  移液枪打油诗

  移液枪是公家买 科学使用要记牢

  马马虎虎用坏枪 实验停滞心发毛

  用枪之前看量程 这个原则很重要

  拧过量程不允许 界限之内随你调

  酚仿抽提最坏枪 吸后枪头要打掉

  枪头不扔且不说 倒置枪身更傻冒

  枪身本是塑料造 氯仿腐蚀完蛋鸟

  EB是强烈致癌物 吸取本应戴手套

  奈何忘乎所以者 戴着手套把枪抱

  EB因此四处污染 害人害己不知道

  用完量程调最大 一把枪能用到老

  遵守规范是公德 美丽环境大家造

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